A kemilumineszcens immunoassay, a CLIA egy nagyon érzékeny immunoassay technika.
1. Alapelv
A kemilumineszcens immunoassay egyesíti az immunválasz specifitását és a kemilumineszcencia nagy érzékenységét. Alapelve az antigén és antitest közötti specifikus immunválasz kombinálása a kemilumineszcencia reakcióval. Pontosabban, a vizsgálandó mintában lévő antigén egy specifikus antitesttel kombinálva immunkomplexet képez. Ezután egy sor kémiai reakción keresztül az immunkomplex kemilumineszcens jelet állít elő. A lumineszcencia intenzitása arányos a vizsgálandó antigén koncentrációjával, a lumineszcencia intenzitás kimutatásával pedig kvantitatívan elemezhető a vizsgálandó antigén tartalma.
2. Fő összetevők
Antitestek: beleértve a befogó antitesteket és a detektáló antitesteket. A befogó antitestet általában szilárd fázisú hordozóra rögzítik, hogy befogják a vizsgálandó antigént. A detektáló antitestet egy kemilumineszcens markerrel kombinálják az immunkomplexben lévő antigén kimutatására.
Szilárd fázisú hordozó: például mikrolemezek, mágneses gyöngyök stb., amelyeket a befogó antitest rögzítésére használnak, hogy megkönnyítsék az immunreakciót, valamint az elválasztást és a mosást.
Kemilumineszcens marker: általában olyan anyag, amely kémiai reakcióban lumineszcens jelet tud produkálni, például luminol, akridinium-észter stb. A marker a detektáló antitesttel kombinálva kemilumineszcens jelet hoz létre az immunreakció után.
Észlelési rendszer: beleértve a kemilumineszcens jelek intenzitásának észlelésére és leolvasható értékké alakítására szolgáló berendezéseket, például lumineszcenciadetektorokat.
3. Jellemzők
Nagy érzékenység: A vizsgált anyag rendkívül alacsony koncentrációit képes kimutatni, ami általában több nagyságrenddel érzékenyebb, mint a hagyományos immunoassay módszerek.
Széles lineáris tartomány: A vizsgált anyag tartalma széles koncentráció-tartományban pontosan mérhető többszöri hígítás nélkül.
Erős specificitás: Az antigén és antitest specifikus kötődése alapján nagymértékben szelektív specifikus tesztanyagokra.
Gyors: Az észlelési folyamat viszonylag gyors, és az eredmények általában rövidebb idő alatt érhetők el.
Magas fokú automatizálás: Alkalmas nagyméretű minták detektálására, és automatizált műszerekkel együtt is használható a detektálás hatékonyságának javítására.
4. Alkalmazási területek
Klinikai diagnózis: Különféle biomarkerek kimutatására szolgál, mint például tumormarkerek, hormonok, fertőző betegségek markerei stb., hogy fontos alapot biztosítson a betegség diagnosztizálásához, a kezelés monitorozásához és a prognózis értékeléséhez.
Gyógyszerfejlesztés: A gyógyszerkoncentráció monitorozására, a hatékonyság értékelésére és a gyógyszermetabolizmus kutatására használják.
Élelmiszerbiztonsági vizsgálat: Káros anyagok, növényvédőszer-maradékok, állatgyógyászati szer-maradékok stb. kimutatása az élelmiszerekben.
Környezeti monitoring: Szennyező és mérgező anyagok kimutatása a környezetben.