QPCR szonda módszer

Mar 01, 2022 Hagyjon üzenetet

A koronavírus egyfajta vírus burokkal és lineáris egyszálú pozitív szálú RNS genommal. Átmérője körülbelül 80-120 nm. Jelenleg csak gerinceseket, például embert, egeret, sertést, macskát, kutyát és baromfit fertőz meg. Az új koronavírus COVID{1}} új változatát azonosították, amely vírusos tüdőgyulladást, enyhe lázat, száraz köhögést, nehéz légzési nehézségeket és akár sokkot is okozhat.

Az RXC által kifejlesztett új koronavírus (COVID-19) nukleinsav-detektáló készlet (QPCR próbamódszer) kettős céltervet dolgozott ki az új koronavírus ORF 1ab (RDRP génje) és a vírus N génjét kódoló specifikus konzervált szekvencián alapul. nukleokapszid fehérje. Egylépéses reverz transzkripciós polimeráz láncreakciót (RT-PCR) kombinálva TaqMan hidrolízisszonda technológiával, a minta RNS-ét a fluoreszcencia kvantitatív PCR műszeren a fluoreszcencia jel változásával detektáltuk.

A PCR detektáló rendszer primereket és próbákat tartalmaz a belső standard génekhez. A téves negatív eredmények elkerülése érdekében a mintagyűjtés és -kivonás folyamatát úgy figyelik, hogy megállapítják, hogy a belső standard normális-e.

A Rui Xun Biology által kifejlesztett New Coronavirus (COVID{0}}) nukleinsav-detektáló készlet (digitális PCR-módszer) a cseppecskés digitális PCR-technológiát és a Taqman fluoreszcens szonda technológiáját alkalmazta az új koronavírus minőségi kimutatására.

A mintákat véletlenszerűen osztották be több tízezer, digitális PCR chip által előállított olajcsepphez. A cseppet PCR-rel reagáltattuk. A PCR-reakció befejezése után az egyes cseppek fluoreszcencia jeleit kiolvastuk, és a Poisson-eloszlási elvet alkalmaztuk a statisztikákhoz és elemzésekhez, hogy az új koronavírus (COVID{0}}) specifikus génkópiáit pontosan kimutathassuk.

Közülük a covid{0}} ORF 1ab detektáló próbát FAM fluoreszcenciával, az N gén detektáló próbát hex fluoreszcenciával, a belső standardot pedig Cy5 fluoreszcenciával jelölték.


A szálláslekérdezés elküldése

Haza

Telefon

E-mailben

Vizsgálat